Máy tách và phát hiện axit nucleic hoàn toàn tự động của New Tech

Năm sức mạnh:
● Thiết bị được cấu hình với bước chiết axit nucleic và tinh chế
● Thiết bị được cấu hình với mô-đun chiết siêu âm
● Thiết bị được cấu hình hoàn toàn tự động
● Thiết bị được cấu hình với khả năng khuếch đại nhiệt độ thay đổi
● Thiết bị được cấu hình với bộ thuốc thử kèm theo đầy đủ

1.Thuốc thử phát hiện axit nucleic có cần được chiết xuất và tinh chế không?
Nguyên lý phát hiện axit nucleic như sau: dưới tác dụng của mồi, DNA polymerase được sử dụng để thực hiện khuếch đại phản ứng dây chuyền trên DNA/RNA mẫu (cần phiên mã ngược NA), sau đó phát hiện lượng tín hiệu huỳnh quang được giải phóng để xác định liệu mẫu có chứa axit nucleic (DNA/RNA) của mầm bệnh cần phát hiện hay không.

1) Các mẫu chưa được chiết xuất hoặc tinh chế có thể chứa nhiều thành phần ảnh hưởng đến kết quả cuối cùng: nuclease (có thể hòa tan axit nucleic mục tiêu và gây ra âm tính giả), protease (có thể làm giảm DNA polymerase và gây ra âm tính giả), kim loại nặng muối (dẫn đến bất hoạt synthase và gây ra dương tính giả), PH quá axit hoặc quá kiềm (có thể khiến phản ứng thất bại), RNA không hoàn chỉnh (dẫn đến thất bại sao chép ngược âm tính giả).

2)Một số mẫu khó khuếch đại trực tiếp: Gram dương và một số ký sinh trùng, do thành tế bào dày và các cấu trúc khác của chúng, nếu chúng không trải qua quá trình chiết xuất và tinh chế axit nucleic, bộ dụng cụ không chiết xuất có thể thất bại đối với những trường hợp như vậy. mẫu.

Do đó, nên chọn bộ xét nghiệm hoặc dụng cụ được cấu hình phù hợp với bước chiết axit nucleic.

2. Khai thác hóa học hoặc khai thác phân mảnh siêu âm vật lý?
Nói chung, chiết xuất hóa học có thể được áp dụng cho hầu hết các quá trình tiền xử lý và tinh chế.Tuy nhiên, ở vi khuẩn Gram dương có thành dày và một số ký sinh trùng, cũng có trường hợp chiết xuất hóa học không thể thu được mẫu axit nucleic hiệu quả, dẫn đến phát hiện âm tính giả.Ngoài ra, quá trình chiết hóa học thường sử dụng tác nhân mạnh, nếu rửa giải không triệt để dễ đưa chất kiềm mạnh vào hệ thống phản ứng dẫn đến kết quả không chính xác.

Phân mảnh siêu âm sử dụng phương pháp nghiền vật lý, đã được GeneXpert, một doanh nghiệp hàng đầu trong lĩnh vực POCT sử dụng thành công, và có lợi thế tuyệt đối trong việc chiết xuất axit nucleic của một số mẫu phức tạp (chẳng hạn như Mycobacteria bệnh lao).

Do đó, nên chọn bộ xét nghiệm hoặc dụng cụ được cấu hình với bước chiết axit nucleic.và tối ưu nhất nếu có module chiết siêu âm.

3. Hướng dẫn sử dụng, bán tự động và hoàn toàn tự động?
Đây là vấn đề về chi phí lao động và hiệu quả công việc.Hiện tại, các bệnh viện thú cưng không có đủ nhân viên, việc tách và phát hiện axit nucleic là một công việc đòi hỏi những kỹ năng và kinh nghiệm nhất định.Không còn nghi ngờ gì nữa, máy tách và phát hiện axit nucleic hoàn toàn tự động là sự lựa chọn hoàn hảo.

4. Khuếch đại nhiệt độ không đổi hay khuếch đại nhiệt độ thay đổi?
Phản ứng khuếch đại là một liên kết phát hiện axit nucleic và công nghệ chuyên nghiệp liên quan đến liên kết này rất phức tạp.Nói một cách đại khái, enzyme được sử dụng để khuếch đại axit nucleic.Trong quá trình khuếch đại, tín hiệu huỳnh quang được khuếch đại hoặc tín hiệu huỳnh quang nhúng được phát hiện.Nói chung, tín hiệu huỳnh quang xuất hiện càng sớm thì hàm lượng gen mục tiêu trong mẫu càng lớn.

Khuếch đại nhiệt độ không đổi là khuếch đại axit nucleic ở nhiệt độ cố định, trong khi khuếch đại nhiệt độ thay đổi là khuếch đại tuần hoàn theo đúng quy trình biến tính-ủ-mở rộng.Thời gian khuếch đại nhiệt độ không đổi đã được thực hiện, trong khi thời gian khuếch đại nhiệt độ thay đổi bị ảnh hưởng lớn bởi tốc độ tăng giảm nhiệt độ của thiết bị (hiện nay, nhiều nhà sản xuất đã có thể thực hiện 40 chu kỳ khuếch đại trong khoảng 30 phút).

Nếu các điều kiện trong phòng thí nghiệm tốt và việc phân vùng nghiêm ngặt thì có thể nói rằng sự khác biệt về độ chính xác giữa hai điều kiện này sẽ không lớn.Tuy nhiên, khuếch đại nhiệt độ thay đổi sẽ tổng hợp nhiều sản phẩm axit nucleic hơn trong thời gian tương đối ngắn hơn.Đối với các phòng thí nghiệm không có sự phân vùng nghiêm ngặt và nhân viên được đào tạo chuyên nghiệp, nguy cơ rò rỉ khí dung axit nucleic sẽ lớn hơn, dương tính giả xảy ra một khi rò rỉ xảy ra và cực kỳ khó loại bỏ.

Ngoài ra, khuếch đại nhiệt độ không đổi cũng dễ bị khuếch đại không đặc hiệu khi mẫu phức tạp (nhiệt độ phản ứng tương đối thấp hơn và nhiệt độ kéo dài càng cao thì độ đặc hiệu liên kết mồi càng tốt).

Theo quan điểm của công nghệ hiện nay, việc khuếch đại nhiệt độ thay đổi đáng tin cậy hơn.

5. Làm thế nào để tránh nguy cơ rò rỉ sản phẩm khuếch đại axit nucleic?
Hiện nay, nhiều nhà sản xuất chọn ống PCR loại tuyến làm ống phản ứng axit nucleic, được bịt kín bằng ma sát và sự biến tính nhiệt độ trong sự biến tính nhiệt độ thay đổi trong khuếch đại PCR nhiệt độ thay đổi đạt tới 90 độ
Độ C.Quá trình lặp đi lặp lại giãn nở với nhiệt và co lại với lạnh là một thách thức lớn đối với việc bịt kín ống PCR và ống PCR loại tuyến tương đối dễ gây rò rỉ.

Tốt nhất nên thực hiện phản ứng với bộ/ống kín hoàn toàn để tránh rò rỉ sản phẩm phản ứng.Sẽ thật hoàn hảo nếu có thể tạo ra một bộ dụng cụ kín hoàn toàn để tách và phát hiện axit nucleic.

Vì vậy, máy tách và phát hiện axit nucleic hoàn toàn tự động mới của New Tech có 5 lựa chọn tối ưu trên.